簡析OECD《噴灑或外源施用雙鏈RNAi八戒影院的環境風險評估要（yào）點》

經濟合（hé）作與發展組織（OECD）《噴灑或外源施用雙鏈（liàn）RNAi八戒影院的環境（jìng）風險評（píng）估要點》（八戒影院（yào）係列第104號報（bào）告）是全球首個係統分析dsRNA類八戒影院風險的技術文件，盡管（guǎn）暫不作為指導性文件，但其提出的（de）風險關注要點和監（jiān）管建議為dsRNA類八戒影院的安（ān）全評估提供了重要技術參考。本文聚焦該報告的（de）核心結論，重點闡述dsRNA八戒影院與傳統八戒影院在環境（jìng）風險評估（gū）中的關鍵差異（yì），以期為國內dsRNA八戒影院的研發和監管提供借鑒。

1 報告概要

報告共有十一章，圍繞RNAi八戒影院的核心風（fēng）險問題（tí）展開，主要涵蓋核酸幹擾（RNAi）作用機製與應用，以及風險評估特別關注點等內容。

基於現有科學信息，報（bào）告推論外源噴灑或施用dsRNA類終端產品可能存在與傳統（tǒng）化學八戒影院相似的施藥方（fāng）式和施（shī）用場景，風險評估中需要考慮的因素與傳統（tǒng）化學八戒影院和生物八戒影院類（lèi）似（sì），但需特別關注：非靶標生物影（yǐng）響（xiǎng）（如基因沉默脫靶效應）、環境歸趨（如dsRNA在土壤/水體中的持久（jiǔ）性、分布）對非靶標生物的影響。

針對dsRNA類八戒影院製劑，因製劑配方直接影響其穩定性、遞送效率及環境行為，需額外評估輔料（如穩定劑、遞送材料）對生（shēng）物有效性的影響、劑型相關的暴露風險（施藥人員/非施藥人（rén）員）及環境歸趨（qū）差異。

2 對非靶標生物的影響

外源噴灑的dsRNA八戒影院可能因序列同源性對非靶標生物（如傳粉昆蟲、水生生物等）引發脫靶（bǎ）效應。報告（gào）基於醫學研究數據及不同物種RNAi機（jī）製差異，從序列相（xiàng）似性、暴露可能性和生物響應性三個維度，分析了其對微（wēi）生物、動植物等非靶標（biāo）生物的（de）潛在風（fēng）險。

2.1 基因序列相似可能引發的潛在風險觸（chù）發脫靶基因沉默的風險主要取（qǔ）決於dsRNA與非靶（bǎ）標生物（wù）基（jī）因序列的相似性（xìng）。小RNA可通過與非靶標信使RNA（mRNA）的部（bù）分互（hù）補引發脫靶基因沉默。長度（dù）為（wéi）21 nt（核（hé）苷酸）的核酸鏈，在特異性與脫靶風險間達到最佳平衡，更短或更長的都可能增加脫靶風險。哺乳動（dòng）物（wù），種子區（第2-8位（wèi）核苷酸）的匹配可能足以引發抑製。非靶標（biāo）昆蟲，如基因序列≥19 nt連續匹配，可能對非靶標昆蟲（如蜜蜂）產生基因沉默效應。

報告特別提醒，不能完全通過計算機模擬比較靶標生物序（xù）列（liè）的相似性，序列相似性（xìng）並不等同於實際效應，需（xū）結合實驗驗證。

2.2 RNAi機製差異引發的潛在風（fēng）險（xiǎn）除基因序列相似性外，暴露（lù）濃度、持續時間及物種間RNAi通路差異也會影響基因沉默效應，其效應呈現劑（jì）量依（yī）賴性（xìng），並存在（zài）上下閾值。現有（yǒu）研究表（biǎo）明，極端敏感物種數量（liàng）有限。

微生物，雖然RNAi效應主要存在於真核生物（wù）中，但該屬（shǔ）不同物種對環境RNA的響應存在廣泛差異。土壤微生物（wù）可能通過影響植物攝取間接引發RNAi效應。

昆蟲，對RNAi效應存在顯著差異，不僅（jǐn）存在目間（jiān）、種間及種群差異，且發育早期比晚期更敏感。其中鞘翅目敏感性顯著高於其他目。

植物，因植（zhí）物角質層構成的天然屏障，需經修飾等輔助措施才能產生係統性效應。

哺乳動物，膳食攝入的微小RNA會被消化係統降解，在（zài）特殊條件下（如不同dsRNA濃度、修飾、配方及應（yīng）用場景）是否可能發生（shēng）效應仍存爭議。目前美國環保署和該報告（gào）專家組均認可“無論（lùn）RNA類型或進（jìn）入消化係統時的結構狀態如何，人類攝入的植物材料中表達的內源或外源的RNA都很可能被降解”的（de）結論。

魚類（lèi）、爬行（háng）類與鳥類，其（qí）攝取（qǔ）屏障機製尚不明確（què）。根據現有科（kē）學文獻，美國環保署認為膳食dsRNA攝（shè）取屏障在所有脊椎動物中均存在。

基於以上（shàng）研究，報告建議在評價dsRNA的葉麵施用（yòng）作物保（bǎo）護產品對非靶（bǎ）標生物的風險時，需充分考慮即使近緣屬種對環境RNA的響應也可能存在顯著差異的問題。

2.3 其他潛在風險針對哺乳（rǔ）動物和其他（tā）非靶標生物可能存在的跨界基因（yīn）調控、免疫反應、機（jī）製飽和效應和致敏性風險，報告雖給出結論，但提醒因（yīn）研究結果相對不充（chōng）分，使（shǐ）用時需保（bǎo）持謹慎。

一是針對哺乳動物跨界基因調控，研（yán）究表明，小鼠、靈長類及人類均未（wèi）出現（xiàn）具有（yǒu）生物（wù）學意義的植（zhí）物微小RNA攝取現象。

二是針對（duì）可能引發的免疫反（fǎn）應，報告指出理論（lùn）上環境dsRNA可能刺激哺乳動物和其他非靶標生（shēng）物的先天（tiān）免疫反應（yīng），但目前缺（quē）乏證據。內源dsRNA，澳大利亞、加拿大和美國（guó）監管機構給出了不太可能（néng）引起非靶標哺乳（rǔ）動物的免（miǎn）疫反應的結論。

三是針對可能（néng）存在的機製飽和（hé）效應，現有數（shù）據支持dsRNA八戒影院施用後，環境中RNAi機製飽和對非靶標生（shēng）物構成風險的可能性極低。

四是針對可能（néng）引發的致敏性，由於（yú）RNAi不表達新蛋白，該技術不應存在致敏性問題。

3 環境歸趨及潛（qián）在風險

為界定此問題，報告分析了施用後dsRNA的穩定性與（yǔ）持久性，以及從目標（biāo）植（zhí）物或施藥（yào）位點的遷移情況。

3.1 環（huán）境中的穩定性和降解數（shù）據表明，dsRNA在環境中降解快，持續存在風險較低。施用後，降解過（guò）程與傳統化學八戒影院及生物八戒影院相似，但需要特別關注經穩定性修飾後的製（zhì）劑產品在環境（jìng）（土壤（rǎng）、水體、生物基質）中的降解（jiě）速率，以及關注局部遷移途徑（jìng）（如花（huā）粉（fěn））的潛在影響。

一是土壤降解。dsRNA在（zài）土壤中受溫度、pH、微生物及核酸酶影響（xiǎng），通常＜2天（tiān）降（jiàng）解，與有機質結合可能延緩降解且（qiě）降低生物有效性，累積風險較低。

二是植物表麵降解（jiě）。葉麵dsRNA易被角質層和微生物分解，紫外線加速降解，降雨影響較小。

三（sān）是水體降解。因土壤中快速降解，減少了徑流（liú）遷移。在水中微生物（wù）主導降解，DT50＜3天，7天（tiān）內完全降解，沉積物中DT50＜6天，難以持續存在。

3.2 葉麵吸收、遷移和擴增的可能性葉麵吸收（shōu），外源dsRNA分子可通過葉麵吸收進入植物（wù）細胞，但具體機製尚不明確。現有證據表明，未經修飾的dsRNA難以係統性轉運，有效吸收需依賴特殊製劑或遞送方法。

遷移擴散（sàn），遷移可能通過徑流、滲透、噴霧漂（piāo）移（yí）、花（huā）粉（需關注蜂巢累積（jī）風險）、昆（kūn）蟲攜帶及根（gēn）係吸收等遷移，但前三者為主要途徑，花粉貢獻率雖低但需警惕脫靶效應。

植物體（tǐ）內擴增，dsRNA的擴（kuò）增需依賴與植（zhí）物mRNA的序列同源（yuán）性，因此靶向害蟲基因的dsRNA極難觸發植物體內的擴增機（jī）製。

4 生態毒理學風（fēng）險評估（gū）建議

報告指出，現（xiàn）有化學八戒影院（yào）測試標準和分級評估框架經調整後適（shì）用於dsRNA農（nóng）藥，但需重點關注其（qí）特殊（shū）作用機製帶來的風險。核心建議（yì）包（bāo）括：

一（yī）是暴露水平評估。相較（jiào）於傳統化學八戒影院（yào），dsRNA八戒影院（yào）因施用劑量較低且環境降解迅速（sù），預期環境暴露量有（yǒu）限。建議參考轉（zhuǎn）基因作物Bt蛋白持久性評估方法（fǎ），建立dsRNA環境歸趨標準。

二是非靶標風險評（píng）估原則。優先評估非靶標生物暴露可能性及環境（jìng）RNAi響應性。不能單獨使用序列信息預測脫靶效應。建議（yì）采用生物信息學指（zhǐ）導非靶標物種測試優（yōu）先級排序。

三是脊椎動物安全性。人（rén）類長期安全食用含dsRNA的動植物源性食品（含與人類基因同源序（xù）列）。脊椎動物存在多重吸收屏障：唾液/消化道核酸酶、胃酸環境降解、腸上皮多糖屏障、細胞內溶（róng）酶（méi）體降解係統（tǒng）。哺乳動物吸收（shōu）屏障機（jī）製可推廣至其（qí）他脊椎（zhuī）動物。

四是關注產品（pǐn）特性。需結合施用方（fāng）式（溫室/露天/誘餌/噴霧）評估風險。特殊製劑（如增強靶標吸收（shōu））需額外評（píng）估對dsRNA環境持久性的影響和非靶標生物吸收屏障的改變。

五是現行測（cè）試（shì）方案需要優化。與傳統八戒影院相（xiàng）比需延（yán）長觀察周期，以涵蓋dsRNA八戒影院的延遲效應，增（zēng）加dsRNA降解動（dòng）態監測指標，對RNAi敏（mǐn）感生物需考慮全生（shēng）命周期研究和亞致（zhì）死效應評（píng）估。

六是種間差異認知。目（mù）前無（wú）法預測無脊椎（zhuī）動物類群（qún）對環境dsRNA的響應差異，需開展產品特異性實證測（cè）試。

七是（shì）關於非靶標生物對dsRNA的吸收。製劑（jì）對吸收特性和環（huán）境持久性的影響研究數據，對於準確表征dsRNA的暴露風險至關重要。

八是當產品製劑可能改變dsRNA吸收屏障時，需開展（zhǎn）針對（duì）該製劑的生物體或替代模型毒理學測（cè）試，以更準確（què）評估潛在危害（hài）特性，因此（cǐ）可能需要產品特異性實（shí）證測試，以便確定危害特征、量化（huà）暴（bào）露水平（píng），為風險評估提供依據（jù）。

九是dsRNA農（nóng）藥風險評估方案需進行的調整（zhěng）。評估內容須（xū）包（bāo）含dsRNA隨時間降解的監測結果。對已證實具有環境RNA響應性的生物，需考慮開展生命周期研究，以及非致死效（xiào）應研究。

5 展望

未來監（jiān）管機構及（jí）學術界、產業界研究者需要通力合作，進一步補充和（hé）完善dsRNA類八戒影院在（zài）複雜環境中的行為資料，並建立標準化測試和評價（jià）方法，以加強這一新興（xìng）八戒影院類別的科學（xué）監管。